Ang dami ng pagpapasiya ng glucose ng dugo sa pamamagitan ng paraan ng glucose na oxidase

Ang prinsipyo ng pamamaraan. Ang pamamaraan ay batay sa pagtukoy ng pagkilos ng glucose oxidase enzyme. Ang enzyme na ito ay nag-oxidize ng glucose sa pagkakaroon ng molekular na oxygen upang makabuo ng gluconolactone, na spontaneously hydrolyzes sa gluconic acid. Ang glukosa oxidase ay nag-oxidize ng glucose upang mabuo ang hydrogen peroxide (H₂Oh₂), na tumutugon sa 4-aminoantipyrine at phenol sa ilalim ng pagkilos ng peroxidase. Bilang isang resulta, ang isang kulay rosas na compound ay nabuo, na ang optical density sa 510 nm ay proporsyonal sa konsentrasyon ng glucose sa sample.

glucose + O₂ + H₂Oh → gluconic acid + H₂Oh₂

2 N₂Oh₂ + 4-aminoantipyrine + phenol → quinonymine + 4H₂Oh

Kagamitan Ang CPK, centrifuge, termostat, rack, test tubes, pipette, biological material, reagents na nakapaloob sa gumaganang solusyon.

eksperimentong sample, ml

karaniwang sample, ml

idle test (N₂O), ml

Glucose calibration solution (sanggunian)

Ang mga tubo ay natutuyo sa isang termostat sa 37 ° C sa loob ng 15 minuto, pagkatapos ay colorimetered sa isang CPC na may berdeng filter sa mga cuvettes na may isang kapal ng layer na 5 mm laban sa isang blangkong sample (N₂O). Ang kulay rosas ay matatag sa loob ng 1 oras pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog.

Pagkalkula ang nilalaman ng glucose ay ginawa ng formula:

C =x C pamantayan kung saan

C ay ang nilalaman ng glucose sa eksperimentong sample, mol / l,

Eop - optical density ng sample,

Kumakain - optical density ng sample ng pagkakalibrate,

Pamantayang C - ang nilalaman sa solusyon sa pagkakalibrate, mol / l.

Mga normal na halaga:  mga bagong panganak - 2.8-4.4 mmol / l

 mga bata - 3.9 -5.8 mmol / l

 matanda - 3.9 - 6.2 mmol / l

Hypoglycemia (GHC).Ang pagtaas ng glucose sa dugo ay dahil sa maraming mga kadahilanan, ayon sa kung saan ang dalawang pangkat ng hyperglycemia ay nakikilala.

1. Insular - nauugnay sa hindi sapat na insulin sa katawan o dahil sa kawalang-kilos ng pagkilos nito.

2. Extrainsular (extrainsular) - hindi nakasalalay sa impluwensya ng insulin.

Ang mga sumusunod na proseso ay pinakamahalaga sa pagbuo ng mga HHC: nadagdagan ang glycogen breakdown, nadagdagan na neoglucogenesis, pagsugpo sa synthesis ng glycogen, nabawasan ang paggamit ng glucose ng tisyu sa ilalim ng impluwensya ng mga hormonal na antagonist na insulin: somatotropin, glucorticoids, thyroxine, thyrotropin.

Ang pagkasunud-sunod na hyperglycemia ay nabanggit na may labis na paggamit ng glucose sa dugo (halimbawa, hyperglycemia na may pag-load ng asukal). Ang "Hepatic" hyperglycemia ay nangyayari sa magkakalat na mga sugat sa atay.

Ang paulit-ulit at malubhang hyperglycemia na madalas na sinamahan ng diabetes. Nakaugalian ang paghiwalayin ang diyabetis na nakasalalay sa diabetes mellitus at di-insulin na umaasa sa diabetes mellitus, o, ayon sa pagkakabanggit, uri ng diabetes mellitus at type II diabetes mellitus. Ang pagbuo ng uri ng diyabetis ko ay nauugnay lalo na sa may kapansanan synthesis at metabolismo ng insulin.

Ang pangalawang pangkat ng hyperglycemia ay nauugnay lalo na sa hyperfunction ng mga endocrine gland na gumagawa ng mga hormone - insulin antagonist. Ito ay sinusunod sa mga sakit tulad ng sindrom at sakit ng Itsenko-Cushing, acromegaly, thyrotoxicosis, pheochromocytoma, glucoganoma. Ang mga antas ng glucose sa dugo ay nadaragdagan sa ilang mga sakit sa atay (lalo na, sa 10-30% ng mga pasyente na may cirrhosis ng atay), hemochromatosis (pigment cirrhosis ng pigment atay, diyabetis ng tanso).

Hypoglycemia (GPG) - ang pagbaba ng glucose sa dugo ay madalas na nauugnay sa isang ganap o kamag-anak na pagtaas ng mga antas ng insulin sa dugo. Ang Extrapancreatic hypoglycemia ay nabanggit bilang isang resulta ng isang kawalan ng timbang sa pagitan ng kalubhaan ng mga proseso ng glycogenolysis at glyconeogenesis sa atay sa talamak at talamak na hepatitis, cirrhosis, talamak at subacute na dystrophy ng atay, pagkalasing sa alkohol, pagkalason kasama ng arsenic, posporus, na may matagal na abala sa atay, sakit sa atay. . Ang isang pagbawas sa konsentrasyon ng glucose sa dugo ay madalas na sinusunod sa mga pasyente na nagdurusa mula sa kanser ng esophagus at iba pang mga nakamamatay na mga bukol ng out-of-pancreatic localization (fibroma, fibrosarcoma, neuroma), pati na rin sa walang pagkagimbal na pagsusuka, anorexia, hepatic diabetes, uremia, profuse lactation at glucosuria sa mga buntis.

Ang hypoglycemia ay maaaring maging sentro ng pinagmulan dahil sa trauma ng kaisipan, encephalitis, hemorrhage ng subarachnoid, tumor sa utak.

1. Mga sakit sa pusisyon ng panunaw ng mga karbohidrat.

2. Anong mga uri ng hyperglucoseemia ang kilala sa iyo?

3. Ano ang mga sanhi ng pathological hyperglucoseemia?

4. Ano ang sanhi ng diyabetis na nakasalalay sa insulin mellitus?

5. Ano ang mga biochemical na sanhi ng mga namamana na sakit: a) glycogenosis? b) aglycogenosis? c) fructosemia? d) galactosemia?

6. Ano ang mga pagbabago sa biochemical sa metabolismo ng karbohidrat sa panahon ng pag-aayuno?

7. Ang prinsipyo ng pamamaraan para sa pagtukoy ng pagpapaubaya ng glucose.

Kailan inireseta ang paraan ng glucose na oxidase?

Ang pagsusulit na ito ay ginagamit upang makita ang may kapansanan na pagpapaubaya ng asukal at ang pagbuo ng prediabetes, pati na rin sa taas ng sakit. Ngunit para sa naturang mga layunin, ang pag-aaral ay bihirang ginagamit, ito ay dahil sa mataas na gastos at mahabang pag-asa ng isang resulta. Kadalasan, ang pagpapasiya ng glucose sa dugo at ihi gamit ang pamamaraang ito ay ginagamit sa pagkakaiba-iba ng diagnosis ng mga sakit tulad ng:

Ang asukal ay nabawasan agad! Ang mga diyabetis sa paglipas ng panahon ay maaaring humantong sa isang buong bungkos ng mga sakit, tulad ng mga problema sa paningin, mga kondisyon ng balat at buhok, ulser, gangren at kahit na mga cancer sa cancer! Itinuro ng mga tao ang mapait na karanasan upang gawing normal ang kanilang mga antas ng asukal. basahin mo.

lactose intolerance syndrome,
hindi pagpaparaan ng fructose,
pagtatago ng fructose na may likido sa katawan,
nadagdagan ang konsentrasyon ng pentose sa ihi.

Ang walang alinlangan na bentahe ng pagsubok ng glucose ng oxidase ay ang katumpakan nito.

Ano ang batayan ng pamamaraang ito?

Mayroong iba't ibang mga pamamaraan para sa pagtukoy ng konsentrasyon ng glucose sa dugo, ngunit ang glucose oxidase ang pinaka tumpak. Ito ay batay sa katotohanan na sa panahon ng pakikipag-ugnay ng asukal na may oxygen sa atmospera, ang reagent ay na-oxidized. Ang hydrogen peroxide ay pinakawalan sa solusyon. Ang sangkap na ito ay nakikipag-ugnay sa orthotoluidine upang makabuo ng isang may kulay na compound. Para sa pag-uugali ng reaksyon na ito, kinakailangan ang pagkakaroon ng mga espesyal na enzyme. Sa panahon ng reaksyon ng oksihenasyon, dapat na naroroon ang glucose ng oxidase, at kapag ang paglamlam ng likido, ngunit dapat na narating angxidxidase. Ang intensity ng kulay ng solusyon ay depende sa nilalaman ng glucose at magiging mas matindi sa mataas na nilalaman nito.

Ang kakanyahan ng pagpapasiya ng glucose ng glucose na oxidase

Ang pagsusuri ng resulta ay nangyayari gamit ang dami ng paraan ng photometry pagkatapos ng parehong tagal ng panahon. Ipinag-uutos na gumamit ng isang calibration solution na naglalaman ng isang tiyak na ipinahayag na pamantayan ng asukal at, simula dito, maaari mong hatulan ang konsentrasyon ng glucose sa likido ng katawan, madalas sa dugo.

Paano isinasagawa ang pagsusuri?

Ang materyal ay kinuha mula sa pasyente sa isang walang laman na tiyan. Para sa pagsubok, ang dugo ng venous ay ginagamit sa isang halagang 5 ml. Sa bisperas ng diagnosis, ang pasyente ay ipinakita ng isang mahigpit na diyeta. Ito ay posible upang hatulan ang pagiging maaasahan ng resulta at ibukod ang mga posibleng pagkakamali sa pagsusuri. 2 araw bago kumuha ng dugo, dapat iwanan ng pasyente ang masamang gawi sa pag-inom ng alkohol at paninigarilyo. Kinakailangan din na limitahan ang paggamit ng labis na matamis na pagkain at maiwasan ang mga nakababahalang sitwasyon hangga't maaari.

Upang makakuha ng plasma na may asukal, ang dugo ay nakasentro.

Kadalasan, ang pamamaraang ito para sa pagtukoy ng konsentrasyon ng glucose ay isinasagawa sa pamamagitan ng sentripugasyon, na nabubuo ang mga elemento. Ang halaga ng asukal ay natukoy na sa plasma. Kapag ang lahat ng kinakailangang reagents ay idinagdag dito, ang kulay ay sinusunod pagkatapos ng 20 minuto kung ang pagsubok ay isinasagawa sa temperatura ng silid. Ang pagkalkula ng glucose ay isinasagawa ayon sa iskedyul ng pagkakalibrate o paggamit ng panuntunan ng mga servings.

Reagents ng Pananaliksik

Upang matukoy ang asukal, mas maginhawa ang gumamit ng mga ekspresyong pamamaraan para sa pagtukoy ng glucose sa dugo. Ito ay dahil sa kadalian ng paggamit at mabilis na mga resulta. Bilang karagdagan, ang pasyente ay hindi kailangang pumunta sa laboratoryo o ospital. Ngunit hindi katulad ng pagsubok sa glucose ng glucose ng oxidase, ang isang pagsusuri ay hindi maaasahan. Dahil hindi ito naiiba ang glucose mula sa iba pang mga asukal at tinutukoy ang kanilang konsentrasyon.

Ang batayan ng reaksyon ng glucose na oxidase ay sodium chloride 9% solution at zinc sulfate 50%. Ang mga ito ay idinagdag sa yugto ng sentripugasyon ng dugo. Bilang karagdagan, ginagamit ang isang solusyon sa buffer na may acetic acid at sodium acetate. Ang pamamaraan ng titration ay tumutukoy sa pH nito sa 4.8. Pagkatapos nito, idinagdag ang glucose oxidase, dahil sa kung saan ang hydrogen peroxide at peroxidase ay pinakawalan, na nakikilahok sa paglamlam ng solusyon sa ninanais na konsentrasyon upang makakuha ng isang tumpak na resulta.

Karaniwan sa pagsusuri

Ang pagsukat ng asukal ay naganap sa mga espesyal na yunit - milimol bawat litro ng solusyon.

Ang pagsusuri sa dugo ng glucose oxidase ay dapat na pumasa sa isang walang laman na tiyan at gumamit ng plasma o suwero para dito. Ang pamantayan ng dami nito para sa mga matatanda para sa kapwa kababaihan at kalalakihan ay 3.3-5.5. Para sa mga batang wala pang 15 taong gulang, ang figure na ito ay bahagyang mas mababa at saklaw mula sa 3.2-5.3. Sa mga bagong panganak, ang glucose ng dugo ay 1.7-4.2. Ang isang pagtaas sa mga tagapagpahiwatig ay sinusunod sa pag-unlad ng isang pasyente na may diabetes mellitus o may pagpapahintulot sa glucose na may kapansanan. Ang kundisyong ito ay prediabetes, at kung kaliwa na hindi naipalabas sa oras, agad itong hahantong sa pag-unlad ng malubhang patolohiya na ito.

Mukhang imposible bang pagalingin ang diyabetis?

Ang paghusga sa katotohanan na binabasa mo ang mga linyang ito ngayon, ang isang tagumpay sa paglaban sa mataas na asukal sa dugo ay wala pa sa iyong panig.

At naisip mo na ba ang tungkol sa paggamot sa ospital? Nauunawaan ito, dahil ang diyabetis ay isang mapanganib na sakit, na, kung hindi mababawi, ay maaaring magresulta sa kamatayan. Patuloy na pagkauhaw, mabilis na pag-ihi, lumabo na paningin. Ang lahat ng mga sintomas na ito ay pamilyar sa iyo mismo.

Ngunit posible bang gamutin ang sanhi sa halip na ang epekto? Inirerekumenda namin ang pagbabasa ng isang artikulo sa kasalukuyang mga paggamot sa diyabetis. Basahin ang artikulo >>